ELISA是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的簡(jiǎn)稱,屬于臨床常用的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)。該方法通過抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)與酶催化顯色原理,實(shí)現(xiàn)對(duì)體液樣本中微量物質(zhì)的定量或定性檢測(cè)。
ELISA檢測(cè)的核心原理包含三個(gè)關(guān)鍵步驟:固相包被、免疫反應(yīng)和酶促顯色。首先將已知抗原或抗體固定在微孔板表面,加入待測(cè)樣本后,目標(biāo)分子與固相包被物特異性結(jié)合;隨后加入酶標(biāo)記的二抗,形成復(fù)合物;最終通過底物顯色反應(yīng),利用酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值,推算待測(cè)物濃度。
根據(jù)檢測(cè)設(shè)計(jì)差異,ELISA主要分為四種類型:直接法、間接法、夾心法和競(jìng)爭(zhēng)法。夾心法適用于大分子蛋白檢測(cè),如腫瘤標(biāo)志物CEA、AFP;競(jìng)爭(zhēng)法則常用于小分子物質(zhì)測(cè)定,如激素、藥物濃度監(jiān)測(cè)。
該技術(shù)具有靈敏度高檢測(cè)下限可達(dá)pg/ml、批量檢測(cè)效率高、操作標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)勢(shì),廣泛應(yīng)用于感染性疾病診斷如乙肝五項(xiàng)、HIV抗體篩查、自身免疫病檢測(cè)類風(fēng)濕因子、抗核抗體、過敏原篩查及生物標(biāo)志物監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合判斷,部分項(xiàng)目可能存在假陽性或假陰性情況。